Die Sendung ist eine bunte Mischung aus Interviews mit Persönlichkeiten aus dem politischen, künstlerischen und kulturellen Bereich sowie Berichte mit aktuellem Bezug. Ergänzt werden diese Inhalte mit festen Rubriken, Hörspielserien und Musik.
Rainbow City besteht aus folgenden Sendungen im Wechsel:
- Rainbow City - Radio für Lesben und Schwule
- RadioTuntland
- Prideradio, das Communityradio
- Radio Helferzelle